##acl +All:read #format wiki #language ko #pragma description Membrane Potential & Action Potential; = Compound Action Potential 실습 = <> == 준비 == === Recording 준비 === [[https://www.iworx.com/products/data-recorders/iworx-214-data-recorder/|iWorx-214]] Amplifier & DAC + 신경 chamber + 기록용 PC or Mac {{attachment:CompoundActionPotential_Setup214.jpg||width=600}} * 채널1 (+)전극 ⟷ 채널1 (-)전극 * Stimulation (+)전극 ⟷ Stimulation (-)전극 * 접지 (C)전극 소프트웨어([[https://www.iworx.com/research/software/labscribe/|LabScribe]]) * 설치: [[ftp://oralphys:public@chunglab.ipdisk.co.kr/HDD1/public/LabScribe3_Installer.exe|Windows]] (Vista~Win10) / [[ftp://oralphys:public@chunglab.ipdisk.co.kr/HDD1/public/Lbs3_mac_installer.zip|macOS]] (10.9 이상) * 처음 실행시 ➔ Teaching Mode ➔ English ➔ iwx214 선택 * 설치 안내 동영상: [[https://youtu.be/ry5hwIkgrjQ?t=27s|Windows]] / [[https://youtu.be/bDFG3icI82g?t=21s|macOS]] * Compound Action Potential용 setting 설정 불러오기 {{attachment:LabScribeInstall_2.png|LabScribe Screen|width=500}} 1. 메뉴 ➔ Settings ➔ Load Group ➔ Complete Settings ➔ IPLMv6Complete.iwxgrp 선택 {{attachment:LabScribeInstall_3.png|LabScribe Screen|width=240}}{{attachment:LabScribeInstall_4.png|LabScribe Screen|width=240}} 1. 메뉴 ➔ Settings ➔ Animal Nerve ➔ Compound Action Potential 선택 1. 만약 1번 과정을 거쳐도 Settings에 Animal Nerve가 보이지 않는다면 !LabScribe을 재실행 할 것 * Setting을 불러오면 관련 매뉴얼.pdf가 같이 열림 * !LabScribe의 메뉴에서 Experiment를 선택하면 추가 매뉴얼.pdf 선택 가능 * 기타 일반적인 사용법: [[https://www.iworx.com/teaching-landing/teaching-videos/]] === 신경 샘플 준비 === 1. [[WikiPedia:Pithing]]: 송곳 같은 기구로 CNS를 파괴하는 행위 * 목적: 병든 동물의 인도적 안락사 or 소형 실험 동물의 움직임 제거 * 방법: [[https://youtu.be/wVZpCOTnmc0|YouTube]] ← 보고 따라하되 '''다리는 자르지 말 것!''' 1. 가위로 상악 제거하여 연수 노출 1. 송곳으로 연수 부위 파괴 1. [[https://youtu.be/McTFKXitEmM|이 정도 움찔움찔]]은 정상. 놀라지 말 것. 1. 개구리 [[https://youtu.be/19gZUDlca0c|신경 적출 YouTube]] (참고: [[https://youtu.be/QbxN63V-w7w|근육 적출 YouTube]]) 1. 다리 skin 벗기기 1. [[https://infovisual.info/storage/app/media/02/img_en/028 Skeleton of a frog.jpg|Urostyle bone]](골반뼈 일부) 제거 후 sciatic nerve를 찾아서 '''실로 묶기''' (손잡이 역할) 1. 다리 근육을 손으로 찢으면서 sciatic nerve의 distal end 찾아서 '''실로 묶기''' * 닭고기 찢는 듯한 느낌으로 찢으면 잘 분리됨 * sciatic nerve는 길수록 좋음. 최대한 길게 뽑을 것. 1. Sciatic nerve 양 끝단에 실 묶은 곳 바깥쪽을 가위로 자르고 실을 이용해서 신경을 적출함. 1. Recording chamber에 위치시키고 개구리 링거액을 수시로 뿌려서 마르지 않게 유지 == 실험 == === Research Questions === 1. Threshold 관찰 * Amplitude vs. Time: 어떻게 다른가? 1. Bidirectionality: 방향에 따라 신호 전달이 다른가? 1. Refractory Period 1. 여러 신경의 전달속도 차이 1. Blocker에 의한 효과 관찰 === Trouble Shooting === 1. 확인사항 * Nerve chamber에 nerve가 있고, Stimulation 전극(+/-)과 Recording 전극(+/-)이 신경에 닿았는지? * Stimulation용 + 전극과 - 전극은 iWorx-214 Amplifier의 Stimulation 단자에 연결되었는지? * Recording용 + 전극과 - 전극은 iWorx-214 Amplifier의 Channel 1 단자에 연결되었는지? * 링거액이 전극에 닿지 않았는지? (Stimulation 전기 신호가 신경이 아닌 전해질 용액을 통해 Recording 전극으로 전달될 수 있음) * Ground 전극은 Stimulation 전극과 Recording 전극 사이에 위치했는지? 1. 기본조작 * 화면 조절 {{attachment:LabScribe_ViewOption_1.png|LabScribe Screen|height=40}} 숫자로보기 | 위치 Mark하기 | Stimulation 메뉴보기 {{attachment:LabScribe_ViewOption_2.png|LabScribe Screen|height=40}} x축(Time) scale x 1/2 | 커서 사이 확대 | x축(Time) scale x2 | y축 scale 자동 조절 * Stimulation 메뉴 조작 {{attachment:LabScribe_Stimulation.png|LabScribe Screen|width=600}} * Pulse, Amplitude, Number of Pulses, Width(duration), T off(다음 pulse까지 대기 시간) * Parameter 조작 후 '''Apply 버튼을 꼭 눌러줘야 함''' * Data Export: [[https://kr.mathworks.com/academia|MatLab]], Excel 지원함 ----- <>